Lentiviral Protocole d'emballage

Les scientifiques utilisent des vecteurs lentiviraux à cellules génétiquement ingénieur. Comme lentivirus modifié, au lieu de fournir leur propre information génétique lorsqu'ils infectent une cellule, ils délivrent un gène d'intérêt qui devient une partie de l'ADN cellulaire, exprimée par la cellule.

Lentivirus

Lors de gènes lentiviraux d'intégrer dans l'ADN de la cellule, la cellule produit des protéines pour fabriquer plus de particules virales. Ces protéines virales auto-assemblent et deviennent capsides virales - l'enveloppe du virus externe. La cellule fait également un morceau d'ARN qui contient les gènes nécessaires à la production de particules virales plus. Cet ARN a une séquence de conditionnement spécial que les protéines de particules à reconnaître et à l'intérieur de l'emballage capside. Les particules sortent des cellules, infectent de nouvelles cellules et répéter le cycle.

Emballage

Les scientifiques utilisent ce processus d'emballage pour tromper les particules de virus modifiés dans l'emballage d'un gène d'intérêt, comme la protéine fluorescente verte (GFP). Ils créent un morceau d'ADN - un plasmide - contenant uniquement le signal d'encapsidation et le gène de la GFP. plasmides individuels contiennent des gènes pour faire plus de particules.

transfection

Plasmides mélangés dans une solution de lipide ou de sel sont placées sur des cellules qui absorbent l'ADN et forment des particules de virus pour la collecte à partir du milieu de croissance. Les particules, qui ne contiennent que la séquence du gène de la GFP, peuvent infecter d'autres cellules qui expriment alors la GFP. Ces cellules ne reçoivent pas les gènes pour fabriquer plus de virus, cependant, donc pas de réplication virale se produit.